细胞计数专题 | 荧光染料诱导的微生物培养基背景信号分析

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细胞计数专题 | 荧光染料诱导的微生物培养基背景信号分析

来源：广州虹科电子科技有限公司 2025年06月21日 13:01 8

随着点成微生物细胞计数仪 QUANTOM Tx™的推出，基于单细胞水平的细菌计数方法正在逐步取代传统、耗时的 CFU/ml 测定。该仪器利用细胞膜通透性，借助荧光染料对细菌核酸进行染色，可在几分钟内快速完成准确计数。

在微生物培养过程中，需根据菌种特性、生长条件及研究目标选择合适的培养基。尽管常规培养基本身不具备自发荧光特性，但其成分可能与荧光染料发生相互作用，进而导致背景荧光增强，影响信号判读。因此，建议实验前将培养基（如添加了点成 QUANTOM™ 总细胞染色液）与荧光染料混合，评估背景噪声水平差异，以优化实验条件。

结果与讨论

本研究所测试培养基包括：营养肉汤（NB）、鲁里亚-贝尔塔尼（LB）肉汤、无羊血的大豆肉汤（TSB）、含羊血的大豆肉汤（TSB-SB）、酵母提取物蛋白胨葡萄糖（YPD）培养基、de Man-Rogosa-Sharpe（MRS）培养基。

未添加点成QUANTOM™总细胞染色液时，各培养基均未检测到自发荧光背景信号。添加染色液后所有培养基均出现背景信号增强现象，其中MRS培养基背景噪声显著。建议实验操作时避免将荧光染料直接与培养基混合，而应使用PBS缓冲液稀释培养细胞，以消除背景荧光干扰。

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