由以上可知，微生物的定量分析并不是像我们想的那样，把试管一放，仪器一按，就可以得到答案的。下面就为您解答，当拿到一份未知浓度的细菌培养液时，怎样用OD值来进行定量分析。

（1）怎样选的波长？
答：一般都采用550-650，其实如果波长一定的话，即之后做标准曲线也是当时测量的波长的话，基本没什么影响。

（2）如果菌液超出该菌种浓度的适用范围呢？
答：可以稀释。同行们有个0.2-0.7的说法，但具体如何，感觉也和微生物种类有很大关系。反正如果太浓的话，一定要稀释就对了。

（3）测完OD值，你就知道该菌液的微生物数量了？
答：还没有。还存在2个问题：
①测量OD值的结果反映一般只是总菌数。在对数生长期时，OD值和活菌数呈现一定的线性关系，但稳定期时，细菌的一部分在生长，一部分已经死亡，此时反映的只能是总菌数的增多，但活菌数却无法反映。
②当菌体较为规则，菌群分布较为均匀，干扰OD测量的因素较少，但对于菌体过大或丝状菌体悬液，如丝状真菌，则会因为分布均匀度及折射反射影响光吸收等问题导致测量结果不准确。

解决方案：一般行业中，有估算1 OD=10^8 cells/ml。但是还需要结合具体的菌种，这里推荐方法是可以提前测量一下该菌种的标准曲线或得到一个相关的方程式。横坐标是OD值，纵坐标是该微生物较的计数指标，采用显微镜计数、涂板菌落计数等，或者流式细胞仪都可以，然后你进行换算即可得到菌液的微生物数量了。