发酵材料准备:关于菌种及菌种的选育

发酵工艺流程如图225所示，材料在备发称三产面和的制备发酵培养基的切备移种谷氨能发爵过程的控材谷氮能等电点回权谷氢酸中和、种料味帮的结鼻与干澡损交工作任务根告单图2-25

谷氟酸发酵工艺流程

发酵常用材料有玉米、小麦、甘薯、大米等，其中甘薯和淀粉为常用，大米进行浸泡磨浆，再调节pH为6.0，加。于85℃液化30min，加糖化酶于60℃糖化24h，过滤后可供配制培养基。甘蔗糖蜜、甜莱糖蜜等糖原料不宜直接用来作为发酵的碳源，预处理时可以用活性炭、树脂吸附或破坏，也可以在发酵液中加入表面活性吸附剂或添加。

因此，生产时发酵原料具有定的选择原则。先要考虑菌体生长繁殖的营养，是否有利于的大量积累，还要考虑原料是否丰富、价格便宜，发酵周期是否短，产品是否易提取等因素。表2-21是份较为详细的材料准备单，仅供参考。

表2-21谷氯酸发酵生产准备单

1.关于菌种

目前在发酵生产中所使用的菌种主要如下。

①棒状杆菌属：棒状杆蔽、北京棒状杆菌、钝齿棒状杆菌。

②短杆菌属：黄色短杆菌、天津短杆菌，这些菌种具有以下共同的特征。

①细胞形态为棒状、短杆；

②革兰氏阳性菌，无芽孢，无鞭毛，不能运动；

③都是需氧型；

④都是缺陷型；

⑤紧酶强阳性；⑤不分解淀粉；

⑦脱氢酶活力强；

⑥不分解，并能耐高浓度；

②发酵中菌体发生明显的形态变化，同时细胞膜渗透性发生变化；

⑩CC）。固定反应酶系活力强；

①乙醛酸循环弱；

②-胸戊二酸氧化缺失或敬弱。

2.菌种的选育

根据各个菌种的特征，选择合适的菌种作为培养的对象很重要，因此，在生产实践中，育种思路可以从以下几个方面考虑。

是可通过诱变选育L-的结构类似物抗性突变株和营养缺陷型的回复突变株，以解除自身的反馈抑制和反锁阻遏，增大1秩累量。如可以选育酮基丙二酸抗性突变株、氧肟酸盐抗性突变株、抗性突变株等。

二是增加1的前休物的合成量，可通过选育抗、氟化钠、氮、氟柠檬酸等突变株，以及强化CO，固定反应突变株（选育以琥珀酸或苹果酸为碳源、生长良好的菌株，选育氟丙酮酸敏感性突变株及选育丙酮酸缺陷、天冬氨酸缺陷突变株），使大量积累。

三是选育强化能量代谢的突变株。高产菌的两个显著特点是：a-酮戊二酸继续向下氧化的能力峡陷和乙醛酸循环弱，使能量代谢受阻；TCA循环前阶段的代谢诚慢。强化能量代谢，可补救上述两点不足，使TCA循环前段代谢加强，合成的速度加快。

四是通过选育不能以L为碳源生长的突变株。由于该突变株切断或减弱L-向下步的代谢途径，从而使L-得到持续的积累。

另外需要注意以下几点：

①菌种能高产，先要使菌种具备在高糖、高酸的培养基中仍能正常生长、代谢的能力，即在高渗透压的培养基中菌体的生长和的合成不受影响或影响很小；

②选育细胞膜渗透性好的突变株；③选育减弱HMP途径后段酶活性的突变株。